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      人胰島素原 (PI)ELISA kit使用說明書

      更新時間:2023-12-21      瀏覽次數:328

      人胰島素原  (PI)ELISA使用說明書

      胰島素原(PI)是胰島素的前體激素 , 它是由由胰島β細胞合成和分泌 , 主要 在腎臟分解代謝。生理情況下 ,只有極少量的胰島素原釋放入血 ,在病理情 況下 ,胰島β細胞釋放胰島素原增多 ,血中胰島素原水平升高。 它是細胞在 裂解成成熟胰島素之前分泌的最后一個單鏈蛋白結構。 它是由芝加哥大學的Donald F. Steiner教授在1967年發現的。


      本試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA 。往預先包被有人 胰島素原(PI)捕獲抗體的微孔中 ,依次加入樣本、標準品、生物素標記的檢測 抗體 ,HRP  酶結合物 , 中間經過溫育和洗滌 ,用底TMB  顯色 ,TMB 在過 氧化物酶(HRP)的催化下轉化成藍色 ,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色 的深淺和樣品中的人胰島素原(PI)呈正相關。用酶標儀在 450nm  波長下測定

      吸光度(OD   ,計算樣品濃度。

      靈敏度:4.79pg/mL

      檢測范圍12.5-800pg/mL

      特異性:可檢測樣本中人的PI ,且與其類似物無明顯交叉反應。

      image.png

      濃度(pg/mL)

      800

      400

      200

      100

      50

      25

      12.5

      0

      OD  

      2.32

      1.93

      1.31

      0.85

      0.51

      0.39

      0.28

      0.1

      校正 OD  

      2.22

      1.83

      1.21

      0.75

      0.41

      0.29

      0.18

      -


      試劑盒性能:

      1.    重復性 :板內變異系數小于  10% ,板間變異系數小于  10%。

      2.    回收率 :在選取的健康人血清、血漿和細胞培養上清中加入  3  個不同

      濃度水平的人PI ,計算回收率。

       

      樣本類型

      范圍(%

      平均回收率(%

      血清(n=8)

      84- 101

      96

      血漿(n=8)

      92- 105

      102

      細胞培養上清(n=8)

      96- 108

      105

      3.    線性稀釋:分別在選取的4份健康人血清、血漿和細胞培養上清中加入

      高濃度人PI ,在標準曲線動力學范圍內進行稀釋 ,評估線性。

       

      稀釋比例

      回收率(%

      血清

      血漿

      細胞培養上清

      12

      范圍

       

      84-95

       

      88-97

       

      90- 110

      平均回收率

       

      91

       

      93

       

      96

      14

      范圍

      89- 103

      87- 108

      105- 115

      平均回收率

      94

      98

      109



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